中药指纹图谱技术的发展概述
一、中药指纹图谱的分类
化学指纹图谱是根据中药中化学成分的种类和含量,通过相应的手段获得的指纹图谱。根据使用方法的不同,可分为光谱指纹图谱和色谱指纹图谱两大类。
光谱指纹图谱中有红外光谱、近红外光谱、紫外光谱、X射线衍射光谱、核磁共振光谱、荧光光谱等,直观、简单、易于比较。在特定的环境中,特定的化学结构在光谱中有不同的吸收波长,可以给出有效物质基础的结构信息。刘涛等人[1]在批陈皮标准汤的制备过程中,采用高效液相色谱法测定陈皮标准汤中橙皮苷的含量,用紫外、红外光谱建立陈皮标准汤的指纹图谱,用相关系数法和双指数序列分析法比较不同批次陈皮标准汤的光谱图。本研究建立的质量评价方法可用于陈皮标准汤的系统评价。
色谱法是中药指纹图谱最基础的技术,也是现代中药产业的关键技术。常用的色谱指纹图谱有TLC、LC、GC和HPCE。薄层色谱(TLC)是一种依赖于同一吸附剂对不同化学成分的吸附能力的色谱方法。这是鉴定中药最常用的方法,具有操作方便、设备简单、灵敏度好、可比性大、特异性强、易于显色等优点。可提供色彩斑斓、直观易分辨的可见光或荧光色谱图,可同时比对同一薄板上多个样品的指纹图谱。邹树军等人[2]。建立了龙牙叶总皂苷的HPLC指纹图谱,分析了不同产地、不同采收期龙牙叶成分的差异。
通过对龙牙叶HPLC指纹图谱的研究,结果表明,薄层色谱指纹图谱方法简便、快速、可靠,可用于龙牙叶的鉴别和质量控制评价,确认在东北地区采集的龙牙叶全部符合质量标准。
高效液相色谱法(HPLC)是目前应用最广泛的指纹图谱研究方法之一。具有分离效率高、分析速度快、仪器自动化等特点。由于检测器种类繁多,色谱柱种类繁多,使得HPLC在中药化学成分检测中得到了广泛的应用。张久奎等[3]建立了固相萃取-高效液相色谱法测定可可粉和可可壳中两种脂肪酸色胺的定量分析方法。结果表明,该方法稳定、可靠、灵敏、重现性好、前处理简单。可满足大量样品的日常监测,适用于可可粉的质量评价和掺假鉴定。气相色谱(GC)指纹图谱主要用于中草药和挥发性成分含量较高的制剂的质量鉴别和质量控制。具有分离效率高、灵敏度高、选择性好、样品用量少、分析速度快、适用范围广等优点。
现代生物技术其研究主要依靠二维电泳、电喷雾电离质谱、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱和生物信息学技术。
代谢指纹图谱研究有两类[4],一类是植物和中药代谢组学研究,主要研究不同处理方法对中药的影响,以及提取物的标准化和质量控制等;另一类是中药对动物和人体代谢组学的影响研究,以评价药物的安全性,发现生物活性化合物群及其作用机理研究等。
由于中药指纹图谱具有模糊性,单个指纹反映了一定的中药特征信息。完整的指纹信息库应该规范同一中药多指纹图谱的使用,多光谱组合表达的中药信息更全面,因此多光谱组合获得的指纹图谱在质量控制上更有说服力。
二、中药指纹图谱的建立
中药指纹图谱具有整体性和模糊性两个基本特征。在应用中应首先满足专属性、重复性和实用性的技术要求。中药色谱指纹图谱的建立可以通过以下过程进行[5]。首先,确定研究对象,在采集样本时要注意样本的代表性和批次。研究样品为药材、中间体、注射剂经化学预处理后的试液。其次,选择可以作为标准物质的标准物质。重新确定检测方法和条件,建立对照品指纹图谱和相关参数。最后对中草药、中间体和注射剂的指纹图谱相关性进行了分析和评价。样品前处理是整个过程中的主要环节,直接影响分析结果。对于数据的处理方法也是当前研究的重点,力求找到科学高效的方法,减少冗余,提高药检质量效果。
三、中药指纹图谱的分析方法
在我国中药指纹图谱的发展过程中,出现了许多新的质量评价方法,主要有相似度评价法、化学模式识别法、总统计矩法、中药指纹图谱综合定量方法和色谱指纹图谱超信息特征数字评价系统、中药指纹图谱评价软件、中药指纹图谱专家系统[6]。
四、讨论与展望
中药作为一种天然产物,本身就具有先天的不稳定性。此外,由于采收、加工等因素,其稳定性较难把握,不利于指纹的研究和应用。在建立中药指纹图谱之前,需要查阅药典和大量文献,并进行适当的预实验,选择合适的样品处理方法。由于提取分离方法不同,得到的成分不同,指纹图谱也不同。
文章来源:《中药药理与临床》 网址: http://www.zyylylc.cn/qikandaodu/2021/0214/454.html